تکنیک PCR

راه اندازی روش Real-time PCR برای تشخیص و تعیین کمی ویروس سرخک با استفاده از ژن F

با وجود کنترل بیماری سرخک در جهان, اما گزارش هایی از ابتلا به این ویروس در جمعیت های واکسینه شده وجود دارد. بنابراین تشخیص دقیق و به موقع این ویروس ضروری است. روش های جدید مولکولی در تشخیص ویروس ارائه شده است که توان تعیین مقدار این ویروس را ندارند. هدف از این پژوهش, راه اندازی روشReal-time PCR  با استفاده از ژن F ویروس سرخک بود.مواد و روش ها: این مطالعه با طراحی دو پرایمر و یک پروب راه اندازی و از ژن F کلون شده در داخل پلاسمید pET-22b(+) استفاده گردید. رقت های متوالی در مبنای 10 از پلاسمید استاندارد حاوی ژن آماده شد و منحنی استاندارد رسم گردید. جهت انجام پروژه از کیت Taq Man ساخت شرکت ABI استفاده گردید.یافته ها: حداقل 30 ذره ویروسی در هر واکنش مشخص گردید و در محدوده رقت های 4-10 تا 9-10 معادل (101×3- 106×3) نسخه بهترین حالت خطی برای منحنی استاندارد دیده شد.نتیجه گیری: نتایج نشان داد که تکنیک Real-time PCR می تواند به عنوان روشی بسیار اختصاصی و سریع برای تشخیص و تعیین تعداد ویروس سرخک از نمونه های حاوی این ویروس به کار رود.

 

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *