تشخیص حذف های ناشناخته ژن های آلفا – گلوبین در ناقلین آلفا – تالاسمی با استفاده از روش Real-time PCR

​

تشخیص حذف های ناشناخته ژن های آلفا – گلوبین در ناقلین آلفا – تالاسمی با استفاده از روش Real-time PCR​

آلفا – تالاسمی یکی از شایع ترین اختلالات هموگلوبین در جهان محسوب می شود و در اکثر موارد در نتیجه ایجاد حذف در یک یا هر دو ژن آلفا – گلوبین اتفاق می افتد. حذف های شناخته شده آلفا – گلوبین مانند حذف های 3.7, 4.2, 20.5 کیلوبازی و Med را می توان با روش PCR چندگانه تشخیص داد. با این وجود تعدادی از حذف های ناشناخته در این ژن وجود دارند که با استفاده از روش هایی مانند روش فوق و همچنین روش تعیین توالی قابل تشخیص نخواهند بود. در این تحقیق از روش Real-time PCR به منظور تشخیص وجود یا عدم وجود حذف های ناشناخته استفاده شده است. مواد و روش ها: روش Real-time PCR مبتنی بر استفاده از رنگ سایبرگرین I به منظور تکثیر ژن های a1, a2 و همچنین ژن مرجع CLCN7 انجام پذیرفت و آنالیز داده ها با استفاده از روش مقایسه ای چرخه آستانه برای تعیین میزان ژنی انجام شد. نتایج: نتایج به دست آمده با استفاده از روش مقایسه ای چرخه آستانه نسبت 0.90±0.16 را برای افراد نرمال و نسبت 0.32±0.15 را برای افراد ناقل حذف هتروزیگوت در ژن های a1 و a2گلوبین نشان می دهد. همچنین آنالیز منحنی ذوب اختصاصی تکثیر ژن های مورد نظر را تایید کرد.

نتیجه گیری:

روش Real-time PCR روشی ساده, سریع و مطمئن بوده و می توان از آن برای شناسایی حذف های ناشناخته در ناقلین آلفا – تالاسمی استفاده نمود.

نویسندگان

جمالی سمیه | مهدیان رضا | حیات نوسعید مینا | باباشاه صادق | مریمی فرشته | کریمی پور مرتضی | زربخش بهناز | رحیمی نژاد فائزه | زینلی سیروس |